文献类型：期刊文章

作　　者：李文强[1] 张改生[1] 汪奎[1] 牛娜[1] 潘栋梁[1]

机构地区：[1]西北农林科技大学陕西省作物杂种优势研究与利用重点实验室,杨凌712100

出　　处：《遗传》

基　　金：国家自然科学基金(编号:301705760);国家863重大专项计划(编号:2002AA207004);国家杨凌农业生物技术育种中心专项基金项目资助~~

年　　份：2007

卷　　号：29

期　　号：6

起止页码：771-775

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以小麦黄化苗为材料,通过简单差速离心、DNaseⅠ处理得到无核DNA杂质的线粒体,用SDS和蛋白酶K裂解线粒体,经酚/氯仿抽提除去蛋白,并用RNase A消化而得到单纯线粒体DNA(mtDNA)。对所提取的mtDNA进行紫外吸收光度分析,A260/A280平均为1.92,A260/A230平均为2.09,平均每克黄化苗可提取mtDNA26.85μg;并对mtDNA进行琼脂糖凝胶电泳和RAPD扩增,均得到清晰的电泳图谱。结果表明:此提取方法得到的mtDNA,不但产率高、结构完整,而且能有效去除核DNA、RNA和蛋白质等杂质,获得高质量的mtDNA用于PCR反应和各种遗传学分析。研究还发现,通过调整线粒体裂解温度(先50℃裂解1h,再37℃裂解1h),亦可大幅度提高mtDNA的产率。

关 键 词：小麦 线粒体 MTDNA 提取方法  RAPD

分 类 号：Q943.2[植物生产类]