文献类型：期刊文章

作　　者：潘红春[1] 宋大祥[2] 周开亚[2] 朱国萍[1]

机构地区：[1]安徽师范大学生命科学学院分子进化与生物多样性实验室,芜湖241000 [2]南京师范大学遗传资源研究所,南京210097

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：安徽省高校生物环境与生态安全省级重点实验室资助项目;安徽省重要生物资源保护与利用研究省级重点实验室资助项目。~~

年　　份：2007

卷　　号：23

期　　号：3

起止页码：446-451

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以悦目金蛛(Argiope amoena)丝腺SMARTRACEcDNA文库为模板进行RT-PCR,克隆了1条大壶状腺丝蛋白(major ampullate spidroin,MaSp)基因cDNA序列。该条cDNA序列编码的氨基酸序列可区分为两部分(1)富含丙氨酸的片段和富含甘氨酸的片段相间排列构成的重复氨基酸序列区,并且富含甘氨酸的片段中有脯氨酸分布;(2)约100个氨基酸残基组成的C末端非重复氨基酸序列区。把MaSp基因cDNA序列亚克隆到质粒pET28b(+)中,构建原核表达质粒pET28b(+)-MaSp,表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDS-PAGE、氨基酸组成测定和N末端氨基酸序列测定的结果表明,表达产物为重组MaSp,表达量约为40mg/L。还对C末端非重复氨基酸序列对重组MaSp在水媒介中溶解性的影响进行了探讨。

关 键 词：悦目金蛛 大壶状腺丝蛋白基因  原核表达 pET28b(+)  BL21(DE3)

分 类 号：Q78]