文献类型：期刊文章

作　　者：王承民[1] 初冬[2] 秦建华[3] 刘丽艳[1] 魏刚才[1] 谢红兵[1] 齐永华[1] 王三虎[1] 吴艳云[1] 何宏轩[4]

机构地区：[1]河南科技学院细胞工程重点实验室,河南新乡453003 [2]国家林业局野生动物疫源疫病监测总站,辽宁沈阳110034 [3]河北农业大学动物科技学院,河北保定071001 [4]中国科学院动物研究所国家野生动物疫病研究中心,北京100080

出　　处：《河南农业大学学报》

基　　金：河南科技学院重点基金资助项目(200313)

年　　份：2007

卷　　号：41

期　　号：2

起止页码：207-211

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：应用RT-PCR技术,从稳定分泌抗堆型艾美耳球虫子孢子抗原的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞Easp-3G3中扩增出抗体VH和VL基因,通过在VH和VL可变区基因之间引入连接肽(Gly4Ser)3,体外构建抗堆型艾美耳球虫的单链抗体基因,并将其克隆至表达载体pET28a(+)载体中进行表达,用Ni-NTA的金属亲和层析法进行纯化,通过SDS-PAGE和ELISA测定其纯度和生物学活性.电泳结果分析表明重组蛋白的相对分子量为32kDa,纯度为94%;ELISA反应结果证明该单链抗体保持了单克隆抗体的生物学特性,并能与堆型艾美耳球虫子孢子抗原发生特异性反应.

关 键 词：堆型艾美耳球虫 子孢子 单链抗体 基因克隆 表达  

分 类 号：S852.7]