文献类型：期刊文章

作　　者：梁雪[1] 粟永萍[2] 孔佩艳[1] 陈幸华[1] 彭贤贵[1] 徐辉[2] 曾东风[1] 艾国平[2]

机构地区：[1]第三军医大学附属新桥医院血液科,重庆400037 [2]预防医学院解放军复合伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆400038

出　　处：《医学研究生学报》

基　　金：创伤烧伤复合伤国家重点实验室开放基金课题资助项目(批准号:2003)

年　　份：2007

卷　　号：20

期　　号：5

起止页码：459-462

语　　种：中文

收录情况：CAS、IC、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:体外分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞(hBMSC)。方法:利用密度梯度离心法分离出人骨髓单个核细胞(MNC),通过贴壁筛选法建立hBMSC的体外培养体系,并通过一系列检测方法对所培养的细胞进行鉴定。结果:细胞主要呈“成纤维样”,但体积较大、形状不规则、细胞质突起多,细胞核大而疏松,核仁明显。流式细胞仪检测:CD34阳性率为2.09%、CD29阳性率为94.46%;CD54及CD105表达阳性。细胞周期及透射电镜检测提示细胞处于相对原始状态。免疫细胞化学染色显示:CD14、CD45、胶原蛋白Ⅱ呈阴性;CD106、CD166、纤维连接蛋白、波形蛋白及胶原纤维酸性蛋白呈阳性。细胞化学染色:糖原染色呈强阳性;碱性磷酸酶染色呈阴性。通过诱导分化培养可诱导出成骨细胞。结论:成功建立了稳定的hBMSC体外培养体系,按照此培养体系进行培养可获得hBMSC。hBMSC可传代培养,但在培养过程中细胞逐渐出现老化现象,且不能冻存。

关 键 词：人骨髓间充质干细胞 造血微环境 细胞培养

分 类 号：Q813.11[生物工程类]