文献类型：期刊文章

作　　者：钱林艺[1] 应万涛[1] 刘新[1] 卢庄[1] 蔡耘[1] 何建勇[2] 钱小红[1]

机构地区：[1]北京放射与辐射医学研究所 [2]沈阳药科大学,沈阳110015

出　　处：《分析化学》

基　　金：国家自然科学基金(No.20505019;20405017;20505018);国家重点基础研究发展规划项目(No.2004CB518707);北京市科技计划重大项目(No.H030230280190)资助课题

年　　份：2007

卷　　号：35

期　　号：2

起止页码：161-165

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EI、IC、JST、RCCSE、RSC、SCIE、SCOPUS、UPD、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：建立了18O稳定同位素标记方法,用于复杂体系蛋白质相对定量分析。对影响蛋白质标记稳定性的实验条件进行了比较和优化。结果表明,采用酶切后标记的方法,酶切肽段在胰酶催化下,在pH 5.0的K2HPO4/KH2PO4缓冲体系中,37℃18O标记反应16 h,绝大部分肽段即可达到100%的标记效率。对多个16O/18O成对肽段峰强度的动态范围及定量准确度进行了考察。结果表明,18O标记方法是一种简便、稳定、可靠的相对定量方法,10倍动态范围内,标记率相对标准偏差在18.4%以内,16O/18O峰强度呈很好的线性关系。本实验考察了标记后的肽段在不同溶液体系中的稳定性,为复杂样品的预处理和预分离的溶液条件提供了依据。

关 键 词：稳定同位素标记  ^18O  定量蛋白质组学 质谱 液相色谱

分 类 号：Q51-33]