文献类型：期刊文章

作　　者：高雪敏[1] 刘晓颖[1] 张庆慧[1] 戴寒晶[1] 范礼斌[1]

机构地区：[1]安徽医科大学基础医学院生物学教研室,合肥230032

出　　处：《安徽医科大学学报》

基　　金：安徽省教育厅自然科学基金项目(编号:2003kj189);安徽医科大学博士科研基金项目

年　　份：2007

卷　　号：42

期　　号：2

起止页码：154-157

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的筛选细胞极化蛋白PALS1的结合蛋白,进一步探讨PALS1的功能及其分子机制。方法将PALS1的全长cDNA序列克隆到载体pGBKT7中,重组的pGBKT7-PALS1质粒转入酵母AH109细胞,细胞置于SD/-Trp培养基上生长,阳性细胞再用Hela细胞的cDNA文库质粒转化,生长于SD/-Trp/-Leu/-His/X-α-gal,显蓝色的克隆为阳性。阳性克隆细胞中的DNA被抽提后转化细菌细胞,然后抽提DNA进行酶切分型。合适的类型测序后进行BLAST检索分析。结果筛选到了13个阳性克隆,其中有2个是已知蛋白的基因即ATRAP和GLT28D1。结论利用酵母双杂交系统成功克隆了PALS1的结合蛋白的基因,为进一步研究PALS1蛋白的功能提供了有益的启示。

关 键 词：酵母菌 双杂交系统技术 PALS1  结合蛋白

分 类 号：R341.3[基础医学类]