文献类型：期刊文章

作　　者：张洋[1] 王志强[2] 刘斌[1] 张晓军[1] 姜枫[3] 相建海[1]

机构地区：[1]中国科学院海洋研究所 [2]北京华大基因组研究中心 [3]北京华大基因组研究中心,北京101300

出　　处：《生物工程学报》

基　　金：国家自然科学基金资助(No.30230280;30200213);国家高技术研究与发展项目基金资助(No.2005AA626014)~~

年　　份：2007

卷　　号：23

期　　号：2

起止页码：347-351

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以pUC19、pECBAC1、pCLD04541DNA以及3个不同大小的BACDNA为材料,研究了E.coli DH10B菌株在5个不同脉冲电场下的转化效率。研究发现,随着DNA片段大小的增加,最高转化效率和最适场强迅速减小。利用DH10B细胞转化pUC19 DNA的最适场强是21kV/cm,而190kb BAC DNA仅为13kV/cm;在最适场强下,40kb BAC DNA的转化效率约是190kb BAC DNA的50倍。通过大量数据绘制了不同因素影响下转化效率的变化曲线,优化了E.coli DH10B菌株电转化条件,为质粒的重组转化以及大片段基因组文库的构建奠定了基础。

关 键 词：感受态细胞 电转化 转化效率  脉冲电场强度  质粒DNA

分 类 号：Q78]