文献类型：期刊文章

作　　者：袁小澎[1] 邹全明[1] 吴超[1] 张卫军[1] 郭鹰[1]

机构地区：[1]第三军医大学生物临床微生物及免疫学教研室

出　　处：《广东医学》

基　　金：国家"十五"863课题(编号:2003AA2Z3364)

年　　份：2007

卷　　号：28

期　　号：4

起止页码：521-523

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建表达免疫活性的尿素酶功能片段原核表达体系。方法根据尿素酶B基因序列以及文献报道的尿素酶活性中心区域,primer5.0设计相应的引物,以Hp基因组为模版,PCR扩增拟表达的尿素酶活性片段,经测序证实后将片段亚克隆于原核表达载体pET28中,转入宿主菌BL21后IPTG诱导表达后,Tris-Tricine PAGE电泳及抗Hp特异性抗体western-tbollting鉴定目的蛋白表达。结果PCR从Hp基因组中扩增出414bp目的片段,经酶切及测序证实构建了功能片段表达阳性重组子,命名为pU414,IPTG诱导后电泳分析可以发现相应分子量附近出现可疑目的蛋白,能够被特异性血清识别。结论成功建立尿素酶活性功能片段蛋白表达载体,为下一步实验研究奠定基础。

关 键 词：幽门螺杆菌 尿素酶 功能片段  免疫原性

分 类 号：R378.21]