文献类型：期刊文章

作　　者：孙敏[1] 魏强[2] 梁成珠[1] 佟巍[2] 丛喆[2] 蒋虹[2] 涂新明[2]

机构地区：[1]山东出入境检验检疫局,山东青岛266002 [2]中国医学科学院实验动物研究所中国协和医科大学实验动物学部,北京100021

出　　处：《中国动物检疫》

年　　份：2007

卷　　号：24

期　　号：4

起止页码：32-35

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、RCCSE、核心刊

摘　　要：目的建立检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法并进行初步应用。方法使用ProteinA亲和层析柱纯化腹水中的SIVp27单抗,用过碘酸钠法对单抗进行辣根过氧化物酶标记。经抗体配对实验确定包被抗体和检测抗体,再用棋盘滴定法确定抗体工作浓度后,探索构建检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA法。应用建立的双抗体夹心ELISA法,对SIV模型猴血浆标本和SHIV模型猴病毒分离培养上清标本进行了检测,并将其结果与Coulter公司试剂盒检测结果进行比较。结果以稀释至20ug/mL的2E12为包被抗体、1:400稀释的酶标3G3为检测抗体为ELISA最优体系。模型猴血浆标本和病毒分离培养上清标本的检测结果表明自建体系可以用于SIVp27抗原的检测,特异性良好,灵敏度略低于Coulter公司试剂盒。结论检测SIVp27抗原的双抗体夹心ELISA方法初步建成,为研制有独立知识产权的检测试剂奠定了一定的基础。

关 键 词：SIV P27抗原 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA

分 类 号：S858.28]