期刊文章详细信息
普通变形杆菌TWN-3株基因组文库构建及免疫印迹筛选
Construction and Immunoscreening of Proteus vulgaris TWN-3 strain Genomic Library
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]生物资源与生态环境教育部重点实验室 [2]成都通威水产科技有限公司基因实验室,成都610081
基 金:通威科技发展项目;四川省科技攻关项目(05NG002-002-4)
年 份:2007
卷 号:37
期 号:2
起止页码:12-15
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CSCD、CSCD_E2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:在从患病大口鲇中分离到普通变形杆菌TWN-3株的基础上,将该菌总DNA用EcoRI不完全酶切后,分离5kb左右的片段,连接入pUC18质粒,转化E.coli BL21,构建基因组文库,得到3.6×103个重组子,远大于理论计算的1831个重组子,随机挑选重组子经EcoRI酶切鉴定重组率为100%,文库构建成功;将该菌裂解液与佐剂混合,免疫雄性新西兰大白兔,免疫程序结束后,抽血并分离血清,对用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后的文库进行免疫印迹筛选,最终得到8个阳性克隆子。本实验为该菌的DNA疫苗以及重要基因表达研究打下基础。
关 键 词:普通变形杆菌(Proteus vulgaris) 基因组文库 免疫印迹
分 类 号:Q93-33] S941.4]
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