文献类型：期刊文章

作　　者：张雷[1] 陈建平[1] 张莉[1] 王涛[1] 刘明杰[1] 田玉[1]

机构地区：[1]四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室,成都610041

出　　处：《四川大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金(批准号30300320);教育部博士点专项科研基金(批准号20060610091)资助

年　　份：2007

卷　　号：38

期　　号：2

起止页码：194-197

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建嗜肺军团菌鞭毛亚单位蛋白基因(flaA)的融合表达载体,并在原核系统表达,为进一步研究鞭毛亚单位蛋白的致病作用和免疫保护性提供前提条件。方法以嗜肺军团菌1型DNA为模板,PCR扩增获得嗜肺军团菌flaA基因,与带有硫氧还蛋白基因(Trx)的高效原核表达质粒pET32a(+)定向重组,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),并经限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析后,以IPTG诱导表达Trx-flaA融合蛋白,用SDS-PAGE及Western blot进行鉴定。结果限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析表明,扩增出了嗜肺军团菌1435bp的flaA基因,成功构建了重组质粒pET-flaA,SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒pET-flaA在大肠杆菌中得到了高效融合表达。结论成功构建嗜肺军团菌flaA基因重组质粒,并在原核系统中得到了高效表达。

关 键 词：嗜肺军团菌 鞭毛亚单位基因(flaA)  克隆 表达  

分 类 号：R378]