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家蚕30kD特异性变应原的分析、纯化与质谱鉴定
Analysis, purification and identification of the 30kD specific allergen of Bombyx mori using mass spectrometry
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳518060
基 金:国家重点基础研究发展规划"973"项目(2005CB121000);广东省科技重点计划项目(2003A3080502);深圳市科技计划重点项目(200326)
年 份:2007
卷 号:50
期 号:2
起止页码:101-105
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:以Coca’s提取液分别提取到不同时期家蚕Bombyx mori的粗浸液,利用SDS-PAGE和Western blotting鉴定其特异性变应原,然后用DEAE-52离子交换层析及切胶纯化出30kD的特异性变应原,再经MALDI—TOF在线联机分析,所得质谱数据进入网站搜索分析。结果显示:1~5龄家蚕均有20条左右蛋白带,其中5龄家蚕有23条蛋白带,主带有11条(82、79、60、51、46、38、32、30、28、24和18kD)。选用家蚕过敏患者阳性血清进行免疫印迹,1-4龄家蚕均显示出82和79kD的特异性变应原;但只有5龄家蚕的30kD蛋白为特异性变应原,通过离子交换层析和经切胶纯化出30kD蛋白,再经MALDI—TOF—MS鉴定该蛋白为外膜蛋白。提示家蚕不同时期抗原成分有所变化,5龄家蚕新出现的30kD蛋白为特异性变应原。
关 键 词:家蚕 过敏原 SDS-PAGE Western BLOTTING 离子交换层析 质谱分析
分 类 号:Q966]
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