文献类型：期刊文章

作　　者：牛天敏[1] 马会勤[2] 陈尚武[1]

机构地区：[1]中国农业大学食品科学与营养工程学院教育部北京市功能乳品重点实验室,北京100083 [2]中国农业大学农学与生物技术学院果树学系,北京100094

出　　处：《中国生物工程杂志》

基　　金：国家自然基金资助项目(30371005&39970469)

年　　份：2007

卷　　号：27

期　　号：2

起止页码：58-63

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以栽培大豆北丰12为材料,利用PCR方法克隆查尔酮合成酶(Chalcone synthase,CHS)全基因,采用SOE法克隆得到去掉内含子的查尔酮合成酶基因,核酸序列分析表明,该基因编码区长1170bp,编码390个氨基酸,与已报道的GMCHS8(GenBank:AY237728)的cDNA序列相似率达到97%。构建pET-GMCHS工程表达质粒,通过大肠杆菌E.coliBL21(DE3)高效表达系统表达大豆CHS。通过12%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明,获得了分子量在42.9kDa的一条蛋白质特异表达带。液相色谱分析大肠杆菌E.coliBL21(DE3)高效表达系统在雪莲提取液中的代谢产物,样品和空白对照样对比,样品在273nm,3.0min出现新的吸收峰,质谱分析结果表明CHS利用雪莲提取液中代谢中间产物合成了新的黄酮类物质。

关 键 词：GLYCINE MAX L.Merr.  查尔酮合成酶 基因克隆  表达E.coli  雪莲

分 类 号：Q786]