文献类型：期刊文章

作　　者：鄢华[1] 吴小兵[2] 郭艳红[3] 张鹏[4] 陈莉[4] 董小岩[2] 王贵松[3] 高炜[3]

机构地区：[1]武汉市亚洲心脏病医院 [2]本元正阳基因有限公司 [3]北京大学第三医院心内科,100083 [4]北京大学医学部心血管所

出　　处：《中华心血管病杂志》

基　　金：国家高技术研究发展计划(2001AA217111,2002AA2Z3324)

年　　份：2007

卷　　号：35

期　　号：1

起止页码：69-73

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨采用腺相关病毒血清型1型的衣壳蛋白构建的"假毒粒"型重组腺相关病毒(rAAV)1载体介导血管内皮生长因子(VEGF)促血管新生的可行性、有效性。方法以每个细胞10~5vg rAAV1-绿色荧光蛋白(GFP)及 rAAV1-VEGF 载体量感染 C2C12细胞(小鼠成肌细胞)分化的肌管,荧光显微镜下观察 rAAV1-GFP 的转染效率。ELISA 法检测 rAAV1-VEGF 转染后细胞上清中VEGF 表达量。构建小鼠后肢缺血模型,术后10天每只小鼠股部缺血骨骼肌内注射3×10^(11)vg 的rAAV1-VEGF 载体,载体转染后1个月 ELISA 法检测小鼠缺血骨骼肌中 VEGF 蛋白表达量。载体转染后6周免疫组化检测小鼠缺血骨骼肌中毛细血管及小动脉新生情况。结果 rAAV1-GFP 感染后120 h 60%～80%的肌管可表达GFP。rAAV1-VEGF 载体感染后第3天细胞上清中分泌的 VEGF 表达量达到高峰,VEGF 浓度为(567.7±16.8)pg/ml。小鼠缺血骨骼肌中 rAAV1-LacZ 载体转染后1个月转染效率可达100%。rAAV1-VEGF 载体转染后1个月平均 VEGF 浓度为(205.4±36.1)pg/mg总蛋白,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01,n=5)。rAAV1-VEGF 载体转染有效促进了血管新生(P<0.001,n=6),载体转染6周缺血骨骼肌中毛细血管计数与小动脉计数分别为(147.0±13.3)/mm^2,(17.0±1.2)/mm^2。结论新型"假毒粒"型 rAAV1-VEGF 载体可能是治疗缺血性心血管疾病更为优越的基因治疗载体。

关 键 词：新生血管化,生理性  血管 内皮生长因子 腺相关病毒

分 类 号：R54]