文献类型：期刊文章

作　　者：许健[1] 于涟[2] 李龙[2] 由振强[1] 万旺军[2] 刘岩[1]

机构地区：[1]浙江大学生物医学工程和仪器科学学院 [2]浙江大学动物预防医学研究所浙江省重点实验室,杭州310029

出　　处：《科技通报》

基　　金：国家"863"高科技研究发展计划资助(101-j99-02);浙江省重点科技项目(011102465);浙江省自然科学基金重大项目(No.ZA0105)

年　　份：2007

卷　　号：23

期　　号：1

起止页码：52-57

语　　种：中文

收录情况：JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：根据鸡白细胞介素18(IL-18)cDNA基因序列设计了1对特异性引物,应用RT-PCR技术,从脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的我国地方品种萧山鸡原代鸡脾细胞中扩增并克隆鸡IL-18全长基因(Genbank accession,AY628648)。扩增片段全长591 bp,共编码197个氨基酸的前体蛋白,其中含有表达完整功能蛋白所必需的起始密码子和终止密码子。该序列与国外报道的鸡IL-18全长基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列的同源性为98.99%,只在引导序列中出现两个氨基酸残基的缺失,分子进化分析表明萧山鸡IL-18基因与火鸡以及家鸭基因形成一个独立的分支。将萧山鸡IL-18成熟蛋白序列插入pGEX-4T-2载体并在E.coli中得到表达,获得45 kD的GST-IL-18融合蛋白,经纯化后用于制备多克隆抗体。本研究对萧山鸡白细胞介素18的全长基因进行了克隆及表达,并对其分子进化进行了分析,为深入研究其功能奠定了基础。

关 键 词：鸡白细胞介素18 克隆 序列分析  分子进化

分 类 号：Q78]