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期刊文章详细信息

Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立    

Development of a RT-PCR assay to detect duck hepatitis virus typeⅠ

  

文献类型:期刊文章

作  者:程安春[1] 汪铭书[1] 信洪一[1] 陈海军[1] 杨苗[1] 郭宇飞[1] 朱德康[1] 贾仁勇[2] 袁桂萍[1] 陈孝跃[1]

机构地区:[1]四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川雅安625014 [2]动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014

出  处:《中国兽医科学》

基  金:国家科技攻关重大项目(2004BA901A03);国家农业科技成果转化资金项目(2006GB2F000249);教育部"新世纪优秀人才支持计划"项目(NCET-04-0906);四川省基础研究重大项目(05JY029-109);四川省杰出青年学科带头人基金后续资助项目(03ZQ026-028);四川省重点建设学科项目(SZD0418)

年  份:2007

卷  号:37

期  号:1

起止页码:38-42

语  种:中文

收录情况:AJ、BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘  要:根据获得的Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHVⅠ)RNA聚合酶基因序列,应用Primer Premier5.0软件设计了1对引物,建立了检测DHVⅠ的RT-PCR方法。该法能从DHVⅠ中扩增到440bp的条带,而对正常鸭胚尿囊液、健康鸭肝、鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅细小病毒、雏鹅新型病毒性肠炎病毒、禽流感病毒(H5N2亚型)、鸭病毒性肿头出血症病毒、鸭源多杀性巴氏杆菌(5:A)的扩增结果均为阴性。该法最低可以检测到30pg的DHV工核酸模板。RT-PCR对DHVⅠ强毒CHv-1株人工感染发病死亡鸭肝的检测结果与病毒分离和Dot—ELISA检测结果的阳性检出率均为100%,对脾、肺、脑病料的检出率显著(P≤0.01)高于病毒分离和Dot-ELISA。RT-PCR、病毒分离和Dot—ELSA对1987~2005年采集且保存于-20℃的经病毒分离已确诊为鸭肝炎的临床送检肝病料的检出率分别为100%(19/19)、36.84%(7/19)和57.98%(11/19),对2000-2005年采集且于-20℃保存的来源于中国18个省份发病鸭群的48份肝病料的检出率分别为100%(48/48)、56.25%(27/48)和75.00%(36/48)。结果表明,建立的RT—PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于DHVⅠ的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。

关 键 词:Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒  RT—PCR检测  应用  

分 类 号:S852.659.6]

参考文献:

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耦合文献:

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引证文献:

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同被引文献:

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