文献类型：期刊文章

作　　者：高峰[1] 杨继要[2] 崔新征[3] 郭亮[3] 杜英[4] 张清勇[3]

机构地区：[1]郑州大学河南省医学科学研究所,郑州450052 [2]郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,郑州450001 [3]郑州大学第二附属医院普胸外科 [4]郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室,郑州450001

出　　处：《郑州大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金资助项目30570625;河南省科研院所专项基金资助项目0441130303

年　　份：2007

卷　　号：42

期　　号：1

起止页码：22-26

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSA、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:建立和优化重症肌无力(MG)胸腺组织蛋白质组双向电泳技术方法。方法:提取MG患者(n=3)增生型胸腺组织蛋白,以固相pH梯度胶条做第一向等电聚焦电泳,SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳为第二向。在以上过程中分别对蛋白提取、等电聚焦程序(A、B、C、D)和凝胶染色方法等各个实验环节进行控制和优化,利用PDQuest7.1.1软件分析获得的二维凝胶图像。结果:①采用一步法提取胸腺组织蛋白质,第一向等电聚焦采用7cmIPG胶条,聚焦程序选择B,硝酸银染色。3例标本重复4次,共获12幅二维凝胶图像。随机选取1例标本的2幅图像,利用软件对2幅中的蛋白点进行匹配,匹配率为82.1%;3份样品共12幅凝胶图像的对比,获得3个共同存在的标志蛋白点,相对分子质量和等电点分别为:A点(82700,7.0)、B点(50700,5.76)和C点(33300,5.02)。②进一步优化上述实验条件,选择1例标本,采用两步法提取胸腺组织蛋白质,选用17cmIPG胶条,聚焦采用程序D,考马斯亮蓝染色,获得的二维凝胶图像与一步法(其他条件相同)比较。一步法可检测到蛋白质点326个,两步法可检测到562个蛋白点。结论:①建立了MG胸腺组织蛋白质组提取的方法。采用两步法可以更有效地提取胸腺组织蛋白质组。②利用优化后的实验方法,获得了MG胸腺组织蛋白二维凝胶图像,为开展MG胸腺组织蛋白质组学研究打下了基础。

关 键 词：重症肌无力 胸腺 蛋白质组 双向电泳

分 类 号：R655.7]