文献类型：期刊文章

作　　者：危敏[1] 马文丽[1] 张宝[1] 孙朝晖[1] 郑文岭[2]

机构地区：[1]南方医科大学分子生物学研究所,广东广州510515 [2]华南基因组研究中心,广东广州510800

出　　处：《基础医学与临床》

基　　金：广州市重大科技攻关项目(01-Z-005-01)

年　　份：2006

卷　　号：26

期　　号：10

起止页码：1112-1117

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CSCD、CSCD2011_2012、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究特异小干扰RNA(sm all interfering RNA,siRNA)对宫颈癌HeLa细胞中人乳头瘤病毒(hum an pap-illom avirus,HPV)18型E6基因的抑制及其对细胞凋亡的影响。方法针对HPV18E6基因设计siRNA序列,经PCR方法体外扩增,得到含有U6启动子以及siRNA序列的PCR产物,利用L ipofectam ineTM2000脂质体转染HeLa细胞,在U6启动子的作用下于细胞内转录siRNA。针对转染后不同时间点采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力,流式细胞仪PI染色法检测细胞凋亡率,RT-PCR测定HPV18E6 mRNA变化。结果转染siRNA后细胞活力受到显著抑制(P<0.05),光镜下出现明显的凋亡形态,72 h的凋亡率达到55.8%。RT-PCR结果显示,细胞转染24、48和72 h后HPV18E6 mRNA分别减少了57%、78%和40%,而siRNA阴性对照与未转染细胞相比差异不显著。结论siRNA可特异有效的干扰宫颈癌HeLa细胞内HPV18E6基因的表达,从而可诱导肿瘤细胞凋亡。

关 键 词：SIRNA HELA细胞 HPV18 E6基因 凋亡

分 类 号：R737.33]