文献类型：期刊文章

作　　者：蒋彦波[1] 揭雨成[1] 周建林[2] 邢虎成[1] 佘玮[1]

机构地区：[1]中国农业科学院麻类研究所,湖南长沙410205 [2]湖南师范大学生命科学院生物化学与分子生物学系,湖南长沙410081

出　　处：《作物学报》

基　　金：National Natural Science Foundation of China(30270849),High-Tech Research and Development Program of China (2001AA241211) and Hunan Provincial Natural Science Foundation (04JJ3016)

年　　份：2007

卷　　号：33

期　　号：1

起止页码：158-162

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EBSCO、FSTA、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以苎麻[Boehmeria nivea（L．）Gaud．]栽培品种芦竹青为材料，经Mse Ⅰ酶切并与相应接头连接，然后与生物素标记的探针（CT）15杂交，再用链亲和素包被磁珠（Dynabeads M-280）捕捉杂交产物，以21碱基接头寡核苷酸为引物经PCR扩增获得了双链目的片段，回收300—1000bp DNA片段，然后克隆到pMD18-T载体上，转化至DH5α中，这样就构建了苎麻富含（GA）n微卫星的部分基因组文库。随机挑取36个克隆，以锚定简单重复序列为引物对其进行PCR筛选。测序分析了22个阳性克隆，每个克隆都含有微卫星DNA，阳性克隆率为61．1％，微卫星种类以与探针互补的（GA／CT）n为主，占83．3％，同时还存在（TG／AC）n和三碱基、六碱基为单元构成的苎麻微卫星，如（GAC）n、（ACG）n、（TCT）n、（TCG）n、（GAA）n、（CCGACG）n、（GAGAAA）n等。最后以18个微卫星位点设计了18对苎麻微卫星特异引物。GMCT重复单元的长度从7到40范围内变化，平均为19．2，显示了它们将产生良好多态性，为一种强有力的遗传标记。苎麻微卫星DNA标记可广泛应用于苎麻基因型鉴定，基因和QTL分析，分子标记辅助育种，系谱分析等。

关 键 词：苎麻[Boehmeria  nivea(L.)Gaud]  微卫星 磁珠 基因组文库 (CA)n重复序列  

分 类 号：S563.1]