文献类型：期刊文章

作　　者：袁成福[1] 杨俊霞[1] 魏丽丽[1] 石华[1] 陈济[1] 宋方洲[1]

机构地区：[1]重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室教育部临床检验诊断学重点实验室,重庆400016

出　　处：《第三军医大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(30671008)~~

年　　份：2007

卷　　号：29

期　　号：1

起止页码：32-35

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、W estern b lot及免疫荧光法检测MCHR2的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR2真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达目的基因。结论真核表达载体成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR2的功能奠定良好的实验基础。

关 键 词：MCHR2  真核表达载体 稳定转染的CHO细胞系  基因表达

分 类 号：R338.2] R394-33[基础医学类]