文献类型：期刊文章

作　　者：董炜疆[1] 冯改丰[1] 宫惠琳[2] 刘苏虎[3] 胡海涛[1]

机构地区：[1]西安交通大学医学院人体解剖学与组织胚胎学系,西安710061 [2]西安变通大学医学院第一附属医院病理科 [3]西安交通大学医学院第二附属医院血液科

出　　处：《四川大学学报（医学版）》

基　　金：国家自然科学基金(批准号30300395,30400515);教育部博士点基金(20030698011)资助~~

年　　份：2006

卷　　号：37

期　　号：6

起止页码：821-824

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨β淀粉样前体蛋白裂解酶(β-site APP cleaving enzyme,BACE)的短干扰RNA(short interfering RNAs,siRNA)对BACE在神经母细胞瘤细胞中的表达的影响,为阿尔茨海默病(AD)的治疗提供新的手段。方法采用PCR分别扩增增强型绿色荧光蛋白(EGFP)、U6启动子和靶向BACE的特异性小干扰RNA(siBACE),随后将相应的序列片段克隆入真核表达载体pLXSN,通过限制性内切酶和测序对该重组表达载体pLXSN/ECFP-U6-siBACE进行鉴定;制备稳定高表达BACE基因的神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株,用荧光显微镜和免疫组织化学的方法观察siRNA对BACE表达的影响。结果限制性内切酶酶切和测序结果均表明成功构建了靶向BACE的短干扰RNA的逆转录病毒载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE;并能特异性地抑制BACE在神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株中的表达。结论成功构建了针对BACE的短干扰RNA的逆转录病毒表达载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE,并能有效抑制哺乳动物BACE基因的表达,该研究将为利用RNA干扰技术作为治疗AD的新方法提供重要的实验基础。

关 键 词：RNA干扰 BACE 基因 阿尔茨海默病

分 类 号：Q78]