文献类型：期刊文章

作　　者：卢洁[1] 金洁[2]

机构地区：[1]浙江大学医学院第一附属医院血液科 [2]浙江大学医学院血液病研究所,杭州310003

出　　处：《中华儿科杂志》

基　　金：浙江省科学技术厅重点资助项目(2003C23013)

年　　份：2006

卷　　号：44

期　　号：10

起止页码：782-786

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,ATO)单用或联合沙利度胺(Thalidomide,THAL)体内诱导人骨髓增生异常综合征(myelodysplasticsyndromes,MDS)荷瘤小鼠细胞凋亡的可能途径和机制。方法用人MDS荷瘤小鼠模型作为实验动物,将48只荷瘤小鼠随机分为治疗组32只(ATO单用或联合THAL)和对照组16只。采用免疫组织化学(immunohistochemistry,HIC)、Western-blot、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、电泳迁移率实验(electrophoreticmobilityshiftassay,EMSA)等多参数方法,检测各组荷瘤组织凋亡相关蛋白和基因的表达水平。结果治疗后2周,(1)IHC检测显示,与对照组比较,治疗组Bcl-2家族促凋亡蛋白Bax表达水平上调(F=1080.150,P<0.01);而抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平下调(F=2777.978,P<0.01),Bax/Bcl-2比值上升。提示ATO诱导细胞凋亡与Bcl-2家族凋亡相关蛋白表达及表达比有关。(2)Western-blot发现,治疗组线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO和细胞色素C(IHC)的表达比对照组明显上调;半胱天冬酶(caspase)9、7、6、3及其下游底物聚ADP核糖聚合酶(PARP)蛋白全长被剪切,表达明显下调,可见caspase9、7、6和PARP激活带表达。提示ATO能通过线粒体介导caspase依赖的途径诱导荷瘤细胞凋亡。(3)治疗组凋亡蛋白抑制因子cIAP蛋白(Western-blot)和SurvivinmRNA(RT-PCR)的表达比对照组明显下调。(4)EMSA实验显示,与对照组比较,治疗组核因子kappaB(NF-kB)活性表达显著下调;而IkB-α(NF-kB抑制子)蛋白表达明显上调(Western-blot).提示ATO诱导荷瘤细胞凋亡涉及NF-kB信号途径。结论ATO体内诱导人MDS荷瘤小鼠细胞凋亡至少通过两条重要的途径:一是线粒体介导-Caspase依赖途径;二是NF-kB信号途径,这两条途径相对独立,又在一定水平上相互关联。认为ATO体内诱导细胞凋亡过程复杂,是多条途径、多个水平、多个步骤和多种因子之间相互协调的网络效应,并非单一途径。实验为临床治疗MDS提供了新的思�

关 键 词：骨髓增生异常综合征  砷剂 细胞系  肿瘤  半胱氨酸  天冬氨酸蛋白酶 NF-κB  细胞凋亡

分 类 号：R55] R-332]