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环介导逆转录等温扩增技术(RT-LAMP)在丙型肝炎病毒基因检测中的应用
Detection of HCV Gene by Reverse Transcription Loop-mediated Isothermal Amplification Method
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所,北京100052 [2]北京金迪克生物技术研究所,北京100176
基 金:科技部重大专项禽流感防治研究(2004BA519A47;2004BA519A34(加强))(2002CB513202)
年 份:2006
卷 号:22
期 号:5
起止页码:334-338
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:该文介绍了一种便捷、灵敏而又特异的环介导逆转录等温扩增基因检测技术,该技术分别使用特异对应于靶序列中8个基因区段的3对特殊引物,并在反转录酶和Bst-DNA聚合酶的作用下对靶序列进行等温核酸扩增反应,整个检测反应只需1~2h。利用这种技术成功检测了丙型肝炎病毒基因,对60份经Real-timePCR或RT—-PCR验证阳性的血清样品检测,阳性符合率为98%。同时,对扩增终产物进一步进行酶切分析,并与HIV、HBV和不同亚型流感病毒RNA进行交叉反应和特异性测试,均与预期结果吻合。将Real-timePCR定量后的RNA系列稀释后对检测方法的灵敏度进行了测试。结果显示,该技术的检测灵敏度在理论上可达到10个拷贝的RNA分子。以上结果证明,RT-LAMP扩增技术是一种检测程序简单、灵敏度和特异性较高的基因检测手段,在丙型肝炎病毒的快速检测方面具有一定的开发潜力。
关 键 词:丙型肝炎病毒 环介导逆转录等温扩增 实时监控聚合酶链反应
分 类 号:R373.21]
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