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抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定
GENERATION AND IMMUNOLOGICAL TRAITS OF MONOCLONAL ANTIBODY FOR PHENOBARBITAL
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]河南科技学院动物科学学院,河南新乡453003 [2]河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002
基 金:国家"863"项目(2001AA249030)
年 份:2006
卷 号:20
期 号:4
起止页码:336-340
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克隆抗体mAb(PB mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PB mAb,并鉴定其免疫学特性。结果表明,BSA-pAPB偶联成功,偶联率为1∶19;筛选出1B9、3C4、3F6、4E6共4株杂交瘤细胞,其中最好的4E6株间接ELISA效价细胞培养上清为1∶8.1×102,腹水为1∶6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.08×1010L/mol,对PB的半数抑制浓度(IC50)为11.35μg/L,与巴比妥的交叉反应率(CR%)为12.4%,与其他化合物无CR。本试验研制出高效价、敏感、特异的PB mAb,可用于PB残留检测的免疫学实验。
关 键 词:苯巴比妥 半抗原 人工抗原 单克隆抗体 免疫学特性
分 类 号:S859.84]
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