文献类型：期刊文章

作　　者：周永安[1] 余新炳[1] 陈海峰[2] 郑焕钦[1] 殷国荣[3] 吴忠道[1] 陈观今[1]

机构地区：[1]中山大学中山医学院病原生物学部 [2]Biological Sciences Department State University of New York,Buffalo,14260 NY,USA [3]山西医科大学基础医学院病原生物学部

出　　处：《中华微生物学和免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(No.30070682);山西省自然科学基金(No.19991082)资助项目

年　　份：2006

卷　　号：26

期　　号：7

起止页码：647-653

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的评价弓形虫SAG1与SAG3基因真核表达质粒DNA免疫小鼠的免疫应答效果。方法以PCR方法扩增出SAG1与SAG3目的基因片段,并插入载体pEGFP-N3以构建重组质粒pE- SAG1／SAG3,瞬时转染细胞Cos-7。质粒pESAG1／SAG3以10μg剂量,脂质体介导肌肉注射BALB／c小鼠,免疫3次,最后一次免疫后4周,观察体液和细胞免疫。RT-PCR方法检测注射部位目的基因的转录;斑点杂交方法检测目的基因是否与小鼠染色体基因组整合。结果质粒pESAG1／SAG3转染细胞后观察到绿色荧光;Western blot显示pESAG1/SAG3表达识别条带在相对分子质量(Mr)66．2×103附近。小鼠免疫后,血清产生抗弓形虫速殖子抗体,诱导IFN-γ及IL-2水平高于对照组。RT-PCR显示首次免疫15 d后,目的基因在肌肉组织中仍有转录,斑点杂交显示目的基因未与小鼠的基因组发生整合,混合质粒注射的小鼠抗弓形虫感染的存活时间延长。结论脂质体介导弓形虫SAG1与SAG3复合编码基因质粒接种小鼠能明显诱导体液和细胞免疫应答。

关 键 词：弓形虫 SAG1 SAG3  脂质体 DNA免疫

分 类 号：R392] R531.8[基础医学类]