文献类型：期刊文章

作　　者：刘广超[1] 马远方[1] 李淑莲[1] 白慧玲[1] 张军[1] 卢峰[1] 杜耀武[1] 赵粤萍[1] 都景芳[1]

机构地区：[1]河南大学细胞与分子免疫学重点实验室

出　　处：《中华微生物学和免疫学杂志》

基　　金：河南省杰出人才创新基金项目(NO.0321001800);河南省医学科技创新人才工程项目(No.2002119)

年　　份：2006

卷　　号：26

期　　号：7

起止页码：632-636

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研制能诱导肿瘤细胞凋亡的抗人DR5单克隆抗体(McAb)。方法以可溶性人死亡受体(death receptor,DR)5胞外段免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备抗人DIL5的MeAb;MTT方法筛选分泌有细胞毒活性McAb的杂交瘤细胞;亲和层析方法纯化McAb;夹心ELISA法测定McAb亚型; Western blot和斑点ELISA法检测McAb的抗原表位类型;间接ELISA法检测McAb的特异性;流式细胞仪检测FTTC-annexinⅤ／PI双色标记的Jurkat细胞的凋亡率;DNA琼脂糖凝胶电泳测定凋亡细胞的DNA片段化。结果获得1株杂交瘤细胞,其分泌的McAb命名为mDRA-6,为IgG1;其抗原表位类型为构象表位;其特异性识别hDR5,与hFas、hDR4等无交叉反应。mDRA-6对Jurkat细胞具有细胞毒作用;经McAb mDRA-6处理后,Jurkat细胞膜表面高表达丝氨酸磷脂,并导致Jurkat细胞中的DNA片段化。结论mDRA-6是一个具有诱导细胞凋亡活性的新的抗人DR5功能性抗体,在以TRAIL／DR5系统进行肿瘤治疗和探讨DR5的功能结构域研究方面具有广泛应用前景。

关 键 词：死亡受体5 细胞凋亡 单克隆抗体

分 类 号：R392]