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彗星试验——一种DNA损伤水平与修复能力的测定方法
An important method to comment on DNA damage and DNA repair ability:Comet assay
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]首都医科大学宣武医院检验科,北京100053 [2]北京大学衰老研究中心 [3]首都医科大学宣武医院心胸血管外科
基 金:北京市自然科学基金资助项目(7062030);中国博士后科学基金资助项目(2005037379)
年 份:2006
卷 号:29
期 号:7
起止页码:651-653
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的介绍彗星试验(Comet assay)方法,并运用其分析人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)及外周血淋巴细胞(Lymphocytes)DNA损伤水平与修复能力。方法将2BS或淋巴细胞悬液与1%低熔点琼脂糖(LMA)等体积混合,铺于0.5%正常熔点琼脂糖(NMA)胶面上,细胞经充分裂解、电泳、PI染色后,用Leica图象分析系统每样本分析100个细胞彗距和彗尾面积。结果多数年轻与老龄2BS细胞、年轻与老龄人群淋巴细胞均无明显彗尾。28PD 2BS经H2O2损伤后彗尾明显,且彗距与彗尾面积随H2O2浓度升高而增大。批间(n=6)重复性实验显示,H2O2处理后细胞彗距s=1.7—3.5(μm)、CV=1.6%-2.8%,彗尾面积百分率s=1.5%-2.3%、CV=1.8%-2.5%。结论年轻与老龄细胞DNA单链断裂水平均较低。H2O2可明显损伤DNA,其损伤水平随H2O2浓度升高而加大,彗星试验是评价DNA损伤水平与修复能力的较好方法。
关 键 词:彗星试验 淋巴细胞
分 类 号:R114]
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