文献类型：期刊文章

作　　者：吴庆丰[1] 王崇英[1] 王新宇[1] 李志孝[2] 王亚馥[3]

机构地区：[1]兰州大学生命科学学院细胞生物学研究所,兰州730000 [2]兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室,兰州730000 [3]兰州大学干旱与草地生态教育部重点实验室,兰州730000

出　　处：《西北植物学报》

基　　金：国家973"项目(G2000018603);国家自然科学基金资助项目(30270965)

年　　份：2006

卷　　号：26

期　　号：7

起止页码：1330-1336

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：以山黧豆叶片为材料,比较分析了蛋白质的不同提取方法,在此基础上着重于样品制备.对IPG胶条的选择,第一向等电聚焦和第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的电泳程序及参数、染色方法等相关技术进行了比较和条件优化.结果显示:采用TCA-丙酮沉淀法提取蛋白质,裂解液中加入Tris-base作为蛋白酶抑制剂,等电聚焦电泳时延长低电压的电泳时间(30 V1、2 h,500 V1、h,1 000 V2、h)以促进盐离子泳出的方法对山黧豆叶片蛋白质进行双向电泳,并用考马斯亮蓝和银染复合染色法进行凝胶染色,能够获得蛋白点清晰的双向电泳图谱,说明用优化后的方法建立起的山黧豆叶片蛋白质双向电泳技术,蛋白质样品制备质量好,电泳分辨率高,完全适合于进一步的蛋白质组学研究.

关 键 词：山黧豆 蛋白质提取 SDS-PAGE双向电泳  蛋白质组学

分 类 号：Q503]