文献类型：期刊文章

作　　者：罗满林[1] 丁建华[1] 王家富[1] 张楚瑜[1]

机构地区：[1]武汉大学病毒系

出　　处：《中国病毒学》

基　　金：中国博士后科学基金

年　　份：1996

卷　　号：11

期　　号：4

起止页码：360-364

语　　种：中文

收录情况：CSCD、CSCD2011_2012、普通刊

摘　　要：以ＢＨＫ－２１细胞单层上增殖的伪狂犬病毒（Ｐｓｅｕｄｏｒａｂｉｅｓｖｉｒｕｓ，ＰＲＶ），经离心浓缩后，用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ消化法分离纯化ＰＲＶ基因组ＤＮＡ。参照ＰＲＶＫａ株和ＮＩＡ－３株蛋白激酶（ＰＫ）基因的ＤＮＡ序列，设计并合成了一对长度为２６ｂｐ和３２ｂｐ的引物，以纯化的ＰＲＶ基因组ＤＮＡ为模板，用ＰＣＲ技术成功地扩增出我国伪狂犬病毒地方株的ＰＫ基因，并将它克隆于ｐＵＣ１９载体。酶切分析结果表明，所获ＰＫ基因克隆在ＰｓｔＩ、ＳｍａＩ、ＸｈｏＩ和ＳａｌＩ上的切点与ＰＲＶＮＩＡ－３株相同。为下一步进行ＰＫ基因的体外缺失和重组，以构建减毒的ＰＫ缺失疫苗株奠定了基础。

关 键 词：伪狂犬病毒 蛋白激酶基因 扩增 聚合酶链反应

分 类 号：S852.655]