文献类型：期刊文章

作　　者：向军俭[1] 汤伟佳[1] 王宏[1] 邓宁[1] 杨红宇[1]

机构地区：[1]暨南大学分子免疫学与抗体工程研究中心,广州510632

出　　处：《免疫学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(30471607);教育部科学技术项目(105175)资助

年　　份：2006

卷　　号：22

期　　号：4

起止页码：451-454

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的选用含高效价碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体的自身免疫病患者外周血淋巴细胞为材料,构建人噬菌体抗体库,并从中筛选抗bFGF抗体克隆。方法收集自身免疫病患者外周血,提取淋巴细胞总RNA后逆转录得到cDNA第一链,经PCR扩增重链Fd段和轻链基因,分别构建到噬菌粒载体pComb3中,将重组噬菌粒载体电转化大肠杆菌XL1Blue,以辅助噬菌体VCSM13超感染,构建人噬菌体抗体库。经过3轮固相筛选,获得能结合bFGF的抗体克隆,并用ELISA进行进一步鉴定及筛选,获得具有高亲和力的抗bFGF噬菌体抗体克隆。结果构建的人源噬菌体抗体库库容为2.5×107,经3轮筛选获得具有bFGF特异性的Fab噬菌体抗体克隆。结论构建了人噬菌体Fab抗体库,并能够从中筛选出与bFGF特异结合的抗体克隆,为bFGF抗体药物研究奠定基础。

关 键 词：bFGF抗体  噬菌体展示 抗体库

分 类 号：Q782] R392]