文献类型：期刊文章

作　　者：张宜乾[1] 张中明[1] 闫英群[1] 董红燕[2]

机构地区：[1]徐州医学院附属医院胸心外科 [2]徐州医学院神经生物研究中心,徐州221002

出　　处：《生理学报》

基　　金：This work was supported by Scientific Foundation of Jiangsu Educational Commission(NO.03JKA300140).

年　　份：2006

卷　　号：58

期　　号：3

起止页码：281-286

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)转基因可促进心肌缺血区血管生成,改善心脏功能,然而长期高水平表达又会引起诸多副作用。为调控VEGF表达,在启动子区加入低氧反应元件(hypoxic response element．HRE)作为调控开关,研究氧环境对VEGF基因mRNA及蛋白产物表达的影响。重组腺相关病毒(recombinant adeno-associ- ated virus,rAAV)作为载体(rAAV-HRE-h-VEGF_(165)),转染离体培养大鼠心肌细胞,在常氧/缺氧(氧浓度1%)/缺氧复氧条件下进行培养,用酶联免疫特异性测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法检测培养液h-VEGF_(165)蛋白浓度,细胞免疫荧光染色观测细胞内h-VEGF_(165)蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT- PCR)方法检测细胞h-VEGF_(165)mRNA表达。结果显示：未转染组、常氧培养组均无h-VEGF_(165)mRNA及其蛋白表达：缺氧培养组h-VEGF_(165)mRNA及蛋白均表达；缺氧复氧4h组的h-VEGF(165)mRNA消失,培养液中h-VEGF_(165)蛋白减少,细胞内h-VEGF_(165)蛋白存在：缺氧复氧8h及12h组的h-VEGF_(165)mRNA消失,培养液和细胞内h-VEGF_(165)蛋白均消失。研究表明,在HRE调控下,缺氧可促使h-VEGF_(165)基因表达,复氧后,h-VEGF_(165)mRNA表达停止,蛋白产物延迟消失。

关 键 词：血管内皮生长因子 低氧反应元件 心肌细胞

分 类 号：R541]