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用凝集素和非同位素标记底物测定核心α-1,6-岩藻糖转移酶及其应用
Determination of Core α-1,6-Fucosyltransferase Using Lectin and Non-isotope Substrate and Its Application
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]上海医科大学,卫生部糖复合物重点实验室
基 金:国家自然科学基金(39040001);CMB基金(93583);卫生部基金资助项目。
年 份:1996
卷 号:12
期 号:1
起止页码:47-52
语 种:中文
收录情况:CSCD、CSCD2011_2012、普通刊
摘 要:报道了一个不需同位素和HPLC的α-1,6-岩藻糖转移酶(α1,6FuT,又称核心岩藻糖转移酶)的测定法,包括从正常人血浆提纯运铁蛋白,消化成带有天冬酰胺(Asn)的二天线N-糖链,去除外端唾液酸和半乳糖后,用生物素酰胺乙酰基团标记其Asn,并以此生物素衍生物标记的Asn-七糖的N-糖链为受体底物,GDP-L-岩藻糖为供体底物,用LCA柱吸附法分离岩藻糖化后的产物,再用HRp-Avidin交联物与柱上带有生物素的产物结合,此HRP-Avidin-生物素。岩藻糖化产物从柱上洗脱后测定HRP活力可代表α1,6FuT活力。此法在较宽的范围内,产物量与酶量和反应时间成正比.人肝细胞癌、亚硝胺诱发大鼠肝癌后期或用佛波酯(PMA)处理人肝癌细胞后,α1,6FuT增高,而用视黄酸或db-cAMP处理人肝癌细胞后,则该酶活力降低。
关 键 词:α-1,6-岩藻糖转移酶 核心岩藻糖 小扁豆凝集素(LCA) 肝癌
分 类 号:R735.7]
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