文献类型：期刊文章

作　　者：姜永萍[1] 张洪波[1] 步志高[2] 李呈军[1] 赵有淑[1] 王秀荣[1] 于康震[3] 陈化兰[1]

机构地区：[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室,哈尔滨150001 [2]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨150001 [3]农业部畜牧兽医总站,北京100026

出　　处：《中国农业科学》

基　　金：国家重点基础研究规划"973"项目(G1999011902)资助

年　　份：2006

卷　　号：39

期　　号：4

起止页码：825-830

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、FSTA、GEOBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的将A/Goose/GuangDong/1/96(H5N1)[GD/1/96(H5N1)]的HA基因插入鸡β-actin启动子高效真核表达载体pCAGGS,构建了DNA疫苗质粒pCAGGHA5,以提高H5亚型禽流感DNA疫苗的表达水平和免疫保护效果。方法将pCAGGHA5和表达GD/1/96(H5N1)HA基因的质粒pCIHA5通过间接免疫荧光法和Western-blot分析检测转染293T细胞后瞬时表达的HA抗原蛋白,随之将pCAGGHA5及pCIHA5分别以100μg和10μg剂量一次免疫3周龄SPF鸡,4周后用100LD50的HPAIVGD/1/96(H5N1)鼻腔途径进行攻击。结果间接免疫荧光法和Western-blot分析表明2种表达质粒均可正确表达H5亚型HA抗原蛋白,载体pCAGGS表达水平显著高于载体pCI;免疫SPF鸡后,100μgpCAGGHA5可形成5/5的免疫保护,100μgpCIHA5可形成2/4的免疫保护,10μgpCAGGHA5可形成对免疫鸡5/5的免疫保护,而10μgpCIHA5则基本不能形成免疫保护,pCAGGHA5诱导的HI抗体水平远远高于pCIHA5。结论鸡β-actin启动子表达载体pCAGGS可显著提高HA基因体外表达水平和H5亚型禽流感DNA疫苗诱导的保护性抗体免疫反应水平,增强免疫保护效果。

关 键 词：禽流感 H5亚型 鸡β-actin启动子  DNA疫苗 免疫保护

分 类 号：S852.5]