文献类型：期刊文章

作　　者：朱健琦[1] 刘志刚[1,2] 高波[1] 吉坤美[3] 邢苗[1,2]

机构地区：[1]深圳大学生命科学学院 [2]深圳市微生物基因工程重点实验室,广东深圳518060 [3]深圳市微生物基因工程重点实验室

出　　处：《昆虫学报》

基　　金：国家"863"计划(2002AA214011);国家自然科学基金项目(30471505;30271226);广东省科技重大专项(2003A3080502);深圳市科技计划项目

年　　份：2006

卷　　号：49

期　　号：2

起止页码：213-218

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)是粉尘螨Dermatophagoidesfarinae主要变应原,可引发Ⅰ型变态反应。挑取纯培养的粉尘螨,提取总RNA,采用RT-PCR方法有效地扩增出DerfⅠ片段,产物连接入T载体(pMD18)。经扩增后,用NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后将目的片段连接到pET24a表达载体上,得到重组质粒pET24a-DerfⅠ,工程菌经IPTG诱导培养,高效表达出DerfⅠ蛋白,该蛋白主要以包涵体形式存在。表达产物经亲和层析纯化,用Westernblot及ELISA方法检测免疫学活性,结果表明目的蛋白具有良好的免疫原性。

关 键 词：粉尘螨 变应原 表达  纯化 特性鉴定  

分 类 号：Q966]