期刊文章详细信息
脐带源间充质干细胞的分离和生物学性状
Isolation and Biological Characteristics of Mesenchymal Stem Cells from Umbilical Cord
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]福建医科大学附属协和医院,福建省血液病研究所 [2]泰达国家干细胞中心,中国医学科学院,中国协和医科大学血液学研究所,天津300020
基 金:国家863计划(2003AA205060);973重大基础研究项目(001CB5101);国家自然科学基金资助项目(30300186)
年 份:2006
卷 号:40
期 号:2
起止页码:99-104
语 种:中文
收录情况:JST、ZGKJHX、普通刊
摘 要:目的建立从脐带分离间充质干细胞的方法,并研究其生物学性状。方法脐带经酶消化后于DMEMLG/F12培养基中培养,倒置显微镜及电镜观察细胞形态学,细胞计数绘制细胞生长曲线,计数成纤维细胞集落形成单位(CFUF),流式细胞仪测定细胞周期及细胞免疫表型,免疫组织化学染色及RTPCR检测其体外诱导成脂肪和成骨分化的能力,RTPCR检测其细胞因子的分泌,与脐血来源CD34+细胞共同培养检测其支持造血的能力。结果经酶消化后,每cm脐带可得到中位数为1.01×106的有核细胞,CFUF产率为1/1609有核细胞,经贴壁传代可分离出成纤维样细胞,细胞倍增时间为(28.02±10.53)h。流式细胞仪分析细胞周期显示,>80%的细胞处于G0/G1期,S+G2+M期的细胞仅占(13.04±4.31)%。免疫表型分析显示,CD13、CD29、CD44、CD105(SH2)、CD73(SH3)、CD166和MHCI阳性,CD45、CD34、CD38、CD31和MHCⅡ阴性。体外诱导实验证实,该细胞具有成脂肪和成骨分化的能力。RTPCR显示,该细胞表达干细胞因子、血小板生成素,酪氨酸激酶受体配基、白细胞介素6、巨噬细胞集落刺激因子、白血病抑制因子、基质细胞衍生因子和血管内皮细胞生长因子,不表达白细胞介素3。与脐血来源CD34+细胞共同培养2周可见鹅卵石形成区,共培养8周证实其支持长期造血能力。结论建立从脐带中分离间充质干细胞的方法,脐带是间充质干细胞的新的来源。
关 键 词:间充质干细胞 脐带 多能干细胞
分 类 号:R329]
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