文献类型：期刊文章

作　　者：孙栋[1] 唐莉丽[1] 王倩倩[1] 杨冬梅[1] 蒋承建[1] 武波[1]

机构地区：[1]广西大学微生物及植物遗传工程教育部重点实验室

出　　处：《广西农业生物科学》

基　　金：国家863计划资助项目(2001AA214141)

年　　份：2006

卷　　号：25

期　　号：1

起止页码：24-29

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、ZGKJHX、ZR、普通刊

摘　　要：以钦州市犀牛角镇晒盐池内（盐浓度〉25％）的土壤样品为研究对象，对土壤混合基因组DNA的提取和纯化方法进行了深入研究，结果表明。冻融法、十二烷基磺酸钠（SDS）和蛋白酶K联合使用的提取法，能有效提高DNA得率，DNA的产量达到每克土壤样品10～15μg。交联聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）、SeDhadex G-200树脂以及大量胶回收的使用，可有效纯化DNA。纯化的DNA产量可达每克土壤样品4～6μg，DNA片段大小〉30kb，将纯化的DNA用BamH Ⅰ部分酶切后构建以pLAFR3为载体的混合基因组文库，该文库包含15600个克隆，外源片段DNA平均大小为18kb。通过DNA序列测定和同源性比较，对从文库中随机挑取的10个克隆进行了序列分析，发现9个外源插入片段包含未知DNA序列。

关 键 词：土壤 DNA提取 DNA纯化 混合基因组DNA文库  

分 类 号：S154.3]