文献类型：期刊文章

作　　者：于浩[1] 蒋虹[1] 佟巍[1] 丛喆[1] 孙敏[1] 冯育芳[1] 王卫[1] 涂新明[1] 魏强[1]

机构地区：[1]中国医学科学院实验动物研究所中国协和医科大学实验动物学部,北京100021

出　　处：《中国实验动物学报》

基　　金：科技部科技基础性工作专项(编号:2002DEA20023)

年　　份：2006

卷　　号：14

期　　号：1

起止页码：32-35

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。方法根据GenBank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度。利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测。结果利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致。AccⅢ限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切。巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高。用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性。结论初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染。

关 键 词：猴副流感病毒SV5  聚合酶链反应 巢式PCR 检测  

分 类 号：Q939.47]