文献类型：期刊文章

作　　者：张崇文[1] 于涟[2] 毛芝娟[1] 褚武英[1] 钱荣华[1]

机构地区：[1]浙江大学生物医学工程学院,浙江杭州310027 [2]浙江大学动物预防医学研究所,浙江杭州310029

出　　处：《水产学报》

基　　金：浙江省科技计划重点科研社会发展项目(2005C23085)

年　　份：2006

卷　　号：30

期　　号：1

起止页码：9-14

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：根据哈维氏弧菌外膜蛋白OmpK的基因序列设计一对引物,应用聚合酶链式反应(PCR)方法,从分离自患病大黄鱼的哈维氏弧菌基因组中扩增获得一段约800bp的序列。将其克隆到pGEMTeasy载体,测序结果证明该序列是哈维氏弧菌外膜蛋白OmpK基因。用PCR方法去除其信号肽序列,定向克隆到原核表达载体pGEX4T2构建重组表达质粒pGEX4TOmpK。IPTG诱导后能够在大肠杆菌BL21中高效表达分子量约为53kD的GSTOmpK融合蛋白。用纯化后的融合蛋白免疫新西兰兔获得了高效价的抗血清。Westernblotting分析表明,它与从哈维氏弧菌中提取的约27kD的外膜蛋白能够发生特异反应,提示外膜蛋白OmpK可能是哈维氏弧菌的重要保护性抗原之一。

关 键 词：哈维氏弧菌 外膜蛋白 OmpK  原核表达

分 类 号：Q78] Q936