期刊文章详细信息
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]山西农业大学,山西太谷030801 [2]农业部动物检疫所
基 金:山西省科技厅项目(项目编号:022044)
年 份:2006
卷 号:28
期 号:2
起止页码:196-200
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:从已建立的抗沙门氏菌单抗中筛选出适用于肠炎沙门氏菌ELISA检验的3-47-26单抗,采用筛选强阳性杂交瘤细胞株制备了高效价的3-47-26单抗。改进用辣根过氧化物酶标记高效价单抗的方法,进行了HRP标记单抗的免疫生物学特性的鉴定。确定了包被浓度和酶标抗体的工作浓度:HRP-3-47-26为1∶100;LPS的包被浓度为400ng/mL。试验中采用LPS与多聚赖氨酸的结合,解决了包被过程中的解吸附作用,增强了包被的稳定性,同时也减少了假阳性反应,优化了包被过程。建立了检测肠炎沙门氏菌的抗原竞争ELISA方法,利用样品中的LPS抑制酶标抗体与包被的LPS结合,以降低底物反应的颜色从而达到检测的目的。通过对210份肠炎沙门氏菌感染鸡泄殖腔棉拭子、羽毛和组织样品先筛选后鉴定的方法进行检测具有明显的抑制作用,通过与国标法对大量的样品检测结果比较表明,竞争ELISA方法的检出率为18.09%;检出阳性样品36份,国标法检出率为17.14%;两者符合率为97.14%。竞争ELISA敏感性和特异性分别为94.4%和97.7%。从而为肠炎沙门氏菌的检测提供了一种敏感、特异的检测方法。
关 键 词:肠炎沙门氏菌 单抗 检测
分 类 号:S852.65]
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