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乳酸片球菌L-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
Cloning and Expression of L-lactate Dehydrogenase Gene from Pediococcus acidilactici in E. coli
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]广西大学生命科学与技术学院/发酵与酶工程研究所,南宁530005
年 份:2006
卷 号:12
期 号:1
起止页码:68-71
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:与其它微生物相比,用大肠杆菌进行发酵生产乳酸有许多优势,但大肠杆菌没有L乳酸脱氢酶基因,不能利用糖发酵生产L乳酸.本文采用PCR技术,以乳酸片球菌(Pediococcusacidilactici)基因组DNA为模板,克隆得到L乳酸脱氢酶(Llactatedehydrogenase)基因,将该基因的ORF连接到表达质粒pET22b(+),获得重组质粒pETldhL.将pETldhL质粒转化大肠杆菌BL21株,实现了ldhL基因的表达;对含有ldhL基因的重组菌株进行表达研究,在30℃以IPTG诱导8h后,SDSPAGE分析可见明显特异性条带,酶活力达到6.49u/mL,是野生菌酶活力(2.82u/mL)的2.3倍.对重组表达的L乳酸脱氢酶生物学特性研究显示,它们的最适反应温度为27~30℃,最适反应pH为5.0~5.3.
关 键 词:L-乳酸 L-乳酸脱氢酶 乳酸片球菌 克隆 表达
分 类 号:Q78]
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