文献类型：期刊文章

作　　者：付涌水[1] 江朝富[1] 曹开源[2] 李树浓[3]

机构地区：[1]广州血液中心临床输血研究所,广州510095 [2]中山大学中山医学院检验系 [3]中山大学基础医学院病理生理教研室,广州510080

出　　处：《热带医学杂志》

基　　金：广东省自然科学基金(No.021798);广州市科技攻关重点项目(No.2003Z2-E4091)

年　　份：2006

卷　　号：6

期　　号：2

起止页码：124-126

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、RCCSE、UPD、WOS、ZGKJHX、ZR、普通刊

摘　　要：目的构建含完整人抗-D抗体重、轻链基因的表达载体,为体外表达完整的抗-D抗体分子打下基础。方法从1株分泌IgM抗-D的细胞株提取总RNA,以随机引物逆转录成cDNA,用所设计的抗体前导区引物进行扩增,克隆、测序后将抗-D抗体重、轻链可变区基因分别和带有人IgG1恒定区和к轻链恒定区的表达载体连接,转化大肠杆菌后提取质粒DNA,用PCR和酶切进行鉴定。结果序列分析发现所扩增的基因符合人Ig的特征,除引导序列外,其余序列和我们以前所发表的Fab段序列一致,PCR和酶切鉴定抗体重、轻可变区基因克隆成功。结论成功地扩增了带引导序列的抗-D抗体可变区基因,并构建了完整人抗-D抗体分子表达载体。

关 键 词：抗-D抗体 表达载体  构建  

分 类 号：R392.32]