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新式SOE PCR高效组装人单链抗体在高容量人天然噬菌体抗体库中的应用
Application of an improved efficient SOE PCR in assembling scFv genes during construction of large human antibody library
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室,合肥230032 [2]军事医学科学院放射医学研究所,北京100850
基 金:安徽省人才开发基金资助(编号:2002Z035)
年 份:2006
卷 号:41
期 号:1
起止页码:10-12
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2004、CAS、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的探讨新式SOEPCR高效组装人单链抗体在高容量人天然噬菌体抗体库中的应用。方法通过引物设计的改变,将6种人VH基因和11种人VL基因利用两步法直接互相两两连接为人scFv基因,并且与传统的SOE法进行对比。scFv基因用于构建噬菌体单链抗体库。结果新式SOEPCR法成功的将6种人VH基因和11种人VL基因连接成66种不同的人scFv基因,与传统的SOEPCR法相比,效率高且方法简便,经过约130次电转化后,抗体库的总库容为5·58×109。结论成功地改进了传统的SOEPCR方法,高效组装了66种不同的人scFv基因,提高了抗体库的多样性。
关 键 词:抗体 细菌 细菌噬菌体/免疫学 免疫球蛋白类 重链 聚合酶链反应
分 类 号:R341[基础医学类] R394-3
参考文献:
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