文献类型：期刊文章

作　　者：熊雄[1] 吴政星[1]

机构地区：[1]华中科技大学生物物理与生物化学研究所,武汉市430074

出　　处：《医学分子生物学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(No.30270363)~~

年　　份：2006

卷　　号：3

期　　号：1

起止页码：17-21

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2011_2012、IC、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的通过小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)和短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)对PC12细胞中Synaptotagmin(syt)基因表达沉默效果的比较,确认siRNA在基因沉默中与shRNA的等效性。方法用T7RNA聚合酶体外合成的针对sytⅠ与Ⅸ的siRNA和在H1·1载体上构建的shRNA表达质粒转染PC12细胞,用标记荧光蛋白和免疫荧光检测shRNA和siRNA的转染率,用Western印迹方法检测沉默效果。结果siRNA和shRNA在PC12细胞中沉默sytⅠ和Ⅸ的表达时,有一致的沉默效率。结论siRNA可作为基因沉默中快速筛选的工具,可在RNA干扰的应用中与shRNA配合使用。

关 键 词：小干扰RNA 短发夹RNA Synaptotagmin基因  序列设计  基因沉默

分 类 号：Q522]