文献类型：期刊文章

作　　者：李明才[1] 何韶衡[1]

机构地区：[1]汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所,广东汕头515041

出　　处：《汕头大学医学院学报》

基　　金：广东省卫生厅立项课题(A2003484)

年　　份：2005

卷　　号：18

期　　号：4

起止页码：228-230

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的:建立一种高效、快速的大肠杆菌感受态细胞制备及质粒转化的方法。方法:质粒DNA加入感受态细胞,经短暂冰浴和热休克后,直接涂布预热至37℃的平板。以大肠杆菌DH5α为受体菌,研究CaCl2溶液浓度、感受态细胞的存放时间、转化时间及转化后的培养时间等对质粒转化效率的影响。结果:以100 mmol/L CaCl2溶液制备感受态细胞,冰浴转化5 min,经42℃热休克作用90 s后直接涂平板筛选转化子,获得与常规转化方法相当的转化效率。CaCl2溶液浓度和感受态细胞的存放时间对转化效率有明显的影响,而转化时间和转化后的振荡培养时间对转化效率的影响不明显。结论:成功地建立了一种高效、快速的感受态细胞制备及质粒转化的方法。

关 键 词：大肠杆菌 质粒 转化  感受态细胞

分 类 号：Q78] R37]