文献类型：期刊文章

作　　者：杜冰[1] 于静[1] 周忠良[1] 章平[2] 郁萌[3] 钱旻[1]

机构地区：[1]华东师范大学生命科学学院免疫学实验室,上海200062 [2]华东师范大学生命科学学院脑功能基因组学研究所,上海200062 [3]澳大利亚CSIRO动物健康研究所

出　　处：《中华肿瘤杂志》

基　　金：上海市科技发展基金重点项目(00JC14049);上海-SK研究与发展基金(2002003-5);上海市教委曙光计划项目(02SG21)

年　　份：2005

卷　　号：27

期　　号：11

起止页码：645-647

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的筛选人源肝癌组织特异性结合短肽。方法体外培养人源肝癌细胞株BEL-7402,建立荷瘤裸鼠模型。尾静脉注射噬菌体12肽文库至荷瘤裸鼠体内,循环20 m in后回收肿瘤组织中噬菌体,同时取正常对照组织进行噬菌体效价测定和免疫组化观察。将回收的噬菌体扩增、纯化,并以此作为起始物进行下一轮筛选。经过3轮体内筛选,得到与肝癌组织或细胞特异结合的肽段。随机挑选噬菌体单克隆进行测序,分析序列同源性后进行体外细胞酶联免疫吸附试验(ELISA)和体内回输实验,验证噬菌体克隆的导向性。结果经过3轮体内筛选,瘤组织中噬菌体的回收率逐步提高,回收量随着输入量的增加迅速增加,而每轮筛选肝组织中的噬菌体回收量始终保持在一个恒定范围,并不随输入量的增加而增加。免疫组化结果显示,第3轮筛选后,瘤组织中的噬菌体得到高水平富集,同时其他组织的非特异性结合降至最低。肝癌细胞特异性结合最强的是A54号单克隆,A67、B2号单克隆次之。B2的导向效果最好,A54次之。通过对噬菌体单克隆的序列分析,初步确定了PSS/PTT基序。结论利用体内噬菌体展示技术,可以成功筛选到与肝癌细胞或组织特异结合的噬菌体肽。

关 键 词：体内噬菌体展示技术  肽库 肝肿瘤 特异性结合肽

分 类 号：R735.7]