文献类型：期刊文章

作　　者：张中明[1] 姜波[1] 董红燕[2] 张宜乾[1]

机构地区：[1]徐州医学院附属医院胸心外科,江苏221002 [2]徐州医学院神经生物研究中心

出　　处：《中华实验外科杂志》

基　　金：江苏省教育厅重点资助项目(03JKA310140)

年　　份：2005

卷　　号：22

期　　号：12

起止页码：1510-1512

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的研究9拷贝低氧反应元件(HRE)对低氧、复氧心肌细胞转染人血管内皮生长因子(hVEGF165)基因表达的调控作用。方法分离新生SD大鼠心肌细胞进行培养,将在 HEK293T细胞进行包装后获得的腺相关病毒转染培养的心肌细胞。心肌细胞分为8组,采用无血清培养基,分别在低氧(氧浓度5％)、正常氧(氧浓度21％)条件进行培养,取低氧／复氧不同时段的心肌细胞或培养液,采用细胞免疫荧光法、ELISA法分别测定心肌细胞及培养液中hVEGF165蛋白表达情况;逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)法测定心肌细胞hVEGF165 mRNA的表达。结果病毒转染率约为87％;转基因低氧1组(A组)、2组(B组)及复氧1组(E组)培养液中hVEGF165蛋白含量显著升高(P<0．01),细胞免疫荧光hVEGF165蛋白染色呈阳性;RT-PCR结果亦显示,转基因低氧1组(A组)、2组(B组)及复氧1组(E组)可见484 bp目的条带。结论在低氧状态下,9 拷贝HRE作为氧敏感调控开关,可促使心肌细胞转染的hVEGF165基因高度表达,而在复氧(正常氧浓度)状态下,hVEGF165因的表达即行中止。

关 键 词：低氧反应元件 血管内皮生长因子 心肌细胞 基因调控 基因表达

分 类 号：R541]