文献类型：期刊文章

作　　者：于涟[1] 李龙[1] 刘岩[1] 郑江涛[1] 魏永伟[1]

机构地区：[1]浙江大学动物预防医学研究所浙江省重点实验室,杭州310029

出　　处：《微生物学报》

基　　金：国家科技攻关计划(2004BA757C);浙江科技计划重点项目(2003C22002)~~

年　　份：2005

卷　　号：45

期　　号：5

起止页码：763-766

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2004、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、IC、JST、PUBMED、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：利用RT-PCR技术从传染性法氏囊病病毒(IBDV)TL2004株感染鸡胚尿囊液中扩增到VP5基因,进而构建了T7启动子控制下的N端GST-Tag融合表达质粒pGEX-VP5。序列测定表明VP5基因全长438bp,编码一个由145个氨基酸组成的VP5蛋白。将pGEX-VP5转化大肠杆菌BL21,在IPTG的诱导下高效表达了GST-VP5融合蛋白(44kD)。通过包涵体纯化的方法,获得的较高纯度的融合蛋白,免疫新西兰兔,Western blot和ELISA分析表明,制备的融合蛋白抗血清效价在1∶12800以上,并具有良好的免疫反应特异性,为进一步研究VP5在IBDV复制与致病中的作用,以及研制IBDVVP5基因缺失疫苗打下了良好的基础。

关 键 词：传染性法氏囊病病毒(IBDV)  VP5基因 表达  多克隆抗体

分 类 号：S852.65]