文献类型：期刊文章

作　　者：曹剑峰[1] 王革非[1] 文力[1] 李均[1] 吴海祥[1] 李清雄[1] 王贞慧[1]

机构地区：[1]丝宝集团科研中心生命科学研究所,武汉430056

出　　处：《中国生物制品学杂志》

年　　份：2005

卷　　号：18

期　　号：5

起止页码：371-374

语　　种：中文

收录情况：AJ、BIOSISPREVIEWS、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2011_2012、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的克隆Leptin基因,构建其重组表达菌株,并对表达产物进行免疫学鉴定。方法利用RT-PCR方法从脂肪细胞RNA中扩增出人瘦素前体(pre-Leptin)的cDNA片段和去信号肽序列的Leptin成熟基因片段,并插入pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),获得表达重组人瘦素(rh-Leptin)的菌株。结果DNA序列分析显示获得的pre-Leptin和成熟基因片段的序列与预计序列一致,菌株诱导后经SDS-PAGE检测,rh-Leptin表达量达菌体总蛋白的40%以上。Western blot分析显示重组Lep-tin具有免疫学活性。结论已获得高效表达Leptin的重组菌株。

关 键 词：Lepfin  克隆  表达  大肠杆菌 N基因 DNA序列分析 SDS-PAGE检测  LEPTIN RT-PCR方法 WESTERN

分 类 号：Q78] S852.659.6]