文献类型：期刊文章

作　　者：李文卉[1] 罗建勋[1] 殷宏[1] 关贵全[1] 马米玲[1] 刘志杰[1] 刘爱红[1] 党志胜[1] 高金亮[1] 任巧云[1]

机构地区：[1]中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃兰州730046

出　　处：《中国兽医科技》

基　　金：国家高技术研究发展计划(863)项目(2003AA241110);国家自然科学基金与JSPS国际合作项目(30270992)

年　　份：2005

卷　　号：35

期　　号：9

起止页码：718-722

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2004、CSCD、CSCD2011_2012、核心刊

摘　　要：采用RT-PCR技术从微小牛蜱饥饿幼蜱破解物中扩增到Bm86基因,将其与巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K重组构建了重组表达载体pPIC9K-Bm86,测序正确后将其用SacⅠ内切酶线性化后采用电穿孔法转化巴斯德毕赤酵母菌GS115,经G418抗性筛选高拷贝重组菌株后用甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western-blotting分析结果表明,诱导表达的培养上清液中表达出具有反应活性的68 ku重组Bm86蛋白,目的蛋白约占培养上清液中蛋白总量的32%以上,诱导96 h目的蛋白的表达量为0.36 mg/mL。

关 键 词：微小牛蜱 Bm86基因  毕赤酵母 真核表达

分 类 号：S852.746] Q786[动物医学类]