文献类型：期刊文章

作　　者：戴淑琴[1] 孙秀英[2] 王军业[3] 曹开源[4] 何丽容[1] 徐霖[4] 袁广卿[4]

机构地区：[1]中山大学肿瘤防治中心检验科,广州510060 [2]山东省临沂市人民医院检验科 [3]中山大学肿瘤防治中心胸科 [4]中山大学中山医学院检验系

出　　处：《中国肿瘤临床与康复》

基　　金：广东省自然科学基金项目(No.021907)

年　　份：2005

卷　　号：12

期　　号：4

起止页码：289-292

语　　种：中文

收录情况：ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的克隆前列腺特异膜抗原(PSMA)基因的编码区序列,并进行真核表达。方法用RT-PCR方法扩增前列腺癌组织标本中的PSMA cDNA序列,并将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0。用脂质体转染法,把pcDNA3.0-PSMA转染哺乳动物细胞,鉴定PSMA蛋白的表达。结果序列测定结果表明,两条引物之间的片断长度为2279 bp,与预期长度一致。将克隆的编码区序列与Genebank的PSMA序列进行Blast对比分析,同源性为99.7%;间接免疫荧光法显示表达的蛋白质为膜蛋白,免疫印迹表明表达蛋白质的分子量为100 000。结论利用RT-PCR技术成功扩增了PSMA编码区序列,经序列分析显示扩增片断的序列正确。构建了PSMA真核表达载体,建立了PSMA稳定表达的细胞株。经免疫分析,证实了真核细胞内表达的PSMA为分子量正确的膜蛋白,且具有良好的抗原性。所获得的PSMA真核表达系统为进一步研究PSMA基因修饰的DCs疫苗对前列腺癌的治疗提供了物质基础。

关 键 词：前列腺肿瘤 前列腺特异膜抗原 克隆 分子 真核表达

分 类 号：R737.25] R730.45[临床医学类]